穿孔素1(PRF1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
ELISA Kit for Perforin 1 (PRF1)
FLH2; HPLH2; P1; PFP; Pore Forming Protein; Cytolysin; Lymphocyte pore-forming protein
- 編號USEB317Hu
- 物種Homo sapiens (Human，人) 相同的名稱，不同的物種。
- 實驗方法雙抗夾心
- 反應時長3h
- 檢測范圍0.625-40ng/mL
- 靈敏度最小可檢測劑量小于等于0.234ng/mL.
- 樣本類型serum, plasma, tissue homogenates, cell lysates, cell culture supernates and other biological fluids
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- 規(guī)格 48T96T 96T*5 96T*10 96T*100
- 價格 ¥ 1397 ¥ 1995 ¥ 8978 ¥ 16958 ¥ 139650
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產品包裝(模擬)
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產品包裝(模擬)
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實驗結果圖
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標準曲線圖
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通過ISO 9001、ISO 13485質量體系認證
特異性
本試劑盒用于檢測穿孔素1(PRF1)，經檢測與其它相似物質無明顯交叉反應。
由于受到技術及樣本來源的限制，不可能完成對所有相關或相似物質交叉反應檢測，因此本試劑盒有可能與未經檢測的其它物質有交叉反應。
回收率
分別于定值血清及血漿樣本中加入一定量的穿孔素1(PRF1)（加標樣品），重復測定并計算其均值，回收率為測定值與理論值的比率。
| 樣本 | 回收率范圍(%) | 平均回收率(%) |
| serum(n=5) | 84-95 | 87 |
| EDTA plasma(n=5) | 85-94 | 89 |
| heparin plasma(n=5) | 78-91 | 86 |
精密度
精密度用樣品測定值的變異系數CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批內差：取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測,每份樣本連續(xù)測定20 次，分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批間差：選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本進行定量測定，每個樣本使用同一試劑盒重復測定8次，分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批內差： CV<10%
批間差： CV<12%
線性
在定值血清及血漿樣本內加入適量的穿孔素1(PRF1)，并倍比稀釋成1:2，1:4，1:8，1:16的待測樣本，線性范圍即為稀釋后樣本中穿孔素1(PRF1)含量的測定值與理論值的比率。
| 樣本 | 1:2 | 1:4 | 1:8 | 1:16 |
| serum(n=5) | 83-101% | 92-101% | 92-105% | 96-104% |
| EDTA plasma(n=5) | 98-105% | 95-104% | 81-95% | 78-89% |
| heparin plasma(n=5) | 88-97% | 91-101% | 80-94% | 96-105% |
穩(wěn)定性
經測定，試劑盒在有效期內按推薦溫度保存，其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響，實驗室的環(huán)境條件需盡量保持一致，尤其是實驗室內溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差。
實驗流程
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備；
2. 加樣（標準品及樣本）100µL，37°C孵育1小時；
3. 吸棄，加檢測溶液A100µL，37°C孵育1小時；
4. 洗板3次；
5. 加檢測溶液B100µL，37°C孵育30分鐘；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分鐘；
8. 加終止液50µL，立即450nm讀數。
實驗原理
將穿孔素1(PRF1)抗體包被于96孔微孔板中，制成固相載體，向微孔中分別加入標準品或標本，其中的穿孔素1(PRF1)與連接于固相載體上的抗體結合，然后加入生物素化的穿孔素1(PRF1)抗體，將未結合的生物素化抗體洗凈后，加入HRP標記的親和素，再次徹底洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的穿孔素1(PRF1)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值)，計算樣品濃度。
增值服務
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參考文獻
| 雜志 | 參考文獻 |
| Diagnostic Microbiology and Infectious Disease | Granzyme B as a diagnostic marker of tuberculosis in patients with and without HIV coinfection [Pubmed:26915636] |
| FASEB?JOURNAL | The immunoregulatory effects of CD8 T-cell–derived perforin on diet-induced nonalcoholic steatohepatitis [Pubmed: 30951375] |
| Theranostics | A novel Granzyme B nanoparticle delivery system simulates immune cell functions for suppression of solid tumors [Pubmed: 31695790] |
| Mol Immunol | CD317 mediates immunocytolysis resistance by RICH2/cytoskeleton-dependent membrane protection [Pubmed: 33223223] |
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| Am J Transl Res | Combined treatment with epigenetic agents enhances anti-tumor activity of T cells by upregulating the ACRBP expression in hepatocellular carcinoma [34377237] |
| Nat Biomed Eng | Cancer-cell stiffening via cholesterol depletion enhances adoptive T-cell immunotherapy [34873307] |
| J Exp Med | Single-cell immune profiling reveals functional diversity of T cells in tuberculous pleural effusion [Pubmed:35061012] |
